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乳腺珠蛋白的研究进展
2008-10-17  
 

田少华

 

【摘  要】 乳腺珠蛋白(MammaglobinMAM)因其在乳腺组织中的特异性,已被人们作为乳腺癌诊断中的标记物研究了近十年。近年来国内外学者对MAM在乳腺、淋巴结、外周血和骨髓中的表达做了大量研究,对乳腺癌的免疫治疗提供了新的发展思路。本文就MAM在乳腺癌诊断和免疫治疗方面的研究做一综述。

【关键词】 乳腺癌;乳腺珠蛋白

                


乳腺癌是女性高发恶性肿瘤,其发病率呈逐年上升的趋势[1],乳腺癌的治疗方法较多,但预后效果却不很理想,主要由于转移复发率高,难以及时诊断[2]MAM在乳腺组织、淋巴结、外周血和骨髓中的特异性高表达为诊断乳腺癌,判断预后复发提供了有效的检测指标。同时也为乳腺癌的治疗开创了新的前景。

 

Mammaglobin的生物学特性

 

1. Mammaglobin基因

Watson MA[3]以正常人乳腺组织为对照,从人乳腺癌组织中经mRNA差异PCR筛选出一个乳腺癌差异表达序列标签(differential expressed sequence tagDEST)片段,1996年他们根据这个DEST设计特异性引物,用cDNA末端快速扩增(rapidamplication of cDNA endsRACE)技术从人乳腺癌细胞株MDA- MB415中克隆该DEST的全长cDNA序列,该序列长503bp,其中开放阅读框279bp,编码93个氨基酸,相对分子质量10.5kd。基因库中没有与该cDNA明显同源的DNA序列,但其翻译产物的氨基酸序列与子宫珠蛋白(uteroglobinUG)超家族成员大鼠前列腺类固醇结合蛋白C3rat prostatic steroid-binding proteinC3Rpsc3)有42%的同源性,与人克拉细胞10kd蛋白(human Clara cell 10-kd proteinhCC10)和兔子宫珠蛋白(rabbit uteroglobinrUG)有26%相同,特别是某些有特定功能的氨基酸在这些蛋白质中完全相同,包括Cys3Cys69(已知在子宫珠蛋白亚基间二硫键的形成中起作用),还有Tyr21(为孕酮结合子宫珠蛋白二聚体所必需)。Watson MA将其命名为人乳腺珠蛋白(MAM),MAM基因也是第1个应用差异筛选分离到的新的乳腺癌相关基因。

FlemingWaston[4]应用原位荧光杂交技术测得MAM基因位于11q13,而JianN[5]的研究显示MAM基因位于11q12.2

2MAM-AMAM-B

MAM-AMAM-B[7]都是子宫珠蛋白超家族成员。MAM-A在正常的乳腺组织和新生瘤上皮中表达受限,而在80%的乳腺癌中特异性高表达。近年来发现与MAM-A同源的MAM-B在乳腺组织中并不特异表达。F Janku[6]QIAmpRNA试剂盒分离mRNA检测了34例接受乳房切除术和非乳房切除术后治愈的乳腺癌患者中两标记物的表达,有12%的患者中检测到了MAM-A,而MAM-B并未检测到。随访21月后有两例患者复发,其中一例骨髓MAM-A阳性,说明可通过RT-PCR检测骨髓中的MAM-A的表达来判断乳腺癌临床和预后的效果[9]

3MAM和亲脂素B

亲脂素B mRNA也是UG超家族成员,在70%的乳腺肿瘤患者中高表达[7]JianN等测得亲脂素B基因位于11q12.2,约400kb[5]CaterD[8]的研究证实,MAM和亲脂素B形成异源双链体,将其纯化后进行结构分析,显示其组装过程包括MAM与亲脂素B信号肽裂解、MAM糖基化、MAM与亲脂素B间形成二硫键。与UG超家族结构相似,该双链体为反向平行双链体,两个分子间形成三个二硫键,二条糖链修饰MAMCD、分子模型和二级结构显示MAM和亲脂素B双链体为α螺旋,多肽链各有4个螺旋,折叠分子组装成α螺旋小球,产生一个能结合类固醇分子的疏水腔。小球各侧螺旋间的环结合糖链,使球形分子终端各突出一条糖链。之后的研究[7]显示在不同时期的肿瘤患者血清中有亲脂素B抗体存在,在20例健康人和30例肺癌患者的血清中未表达。亲脂素BmRNA在乳腺肿瘤中的水平要高于前列腺癌和卵巢癌。

 

临床应用价值

   

研究表明MAM是一种前景良好的乳腺癌标记物,在乳腺癌的诊断、疗效、预后及转移的检测中具有重要意义。

1MAM的特异性应用

    MAM在乳腺组织、淋巴结、外周血和骨髓中都特异性高表达。Barbara[10]对乳腺癌淋巴结中MAMB305DB726Pγ氨基丁酸A型受体π亚基(GABAπ)多基因RT-PCR分析结果显示,在27/27原发性乳腺癌和50/50乳腺癌转移淋巴结标本查到表达,而在27例无乳腺癌淋巴结、22例不同健康组织和14例结肠肿瘤样品中没有显著表   达。Kataoka等应用RT-PCRSLN中癌胚抗原(carcinoe mbryonic antigenCEA)和MAM进行检测,48例乳腺癌患者的SLNHE染色阴性者有25%表达CEA21%表达MAM。有研究者对乳腺癌7种标志物进行评估,乳腺癌细胞中100%查到MAM表达,71%查到CEA表达,二者不出现在正常淋巴结中。A.L.Silva等的临床实验也显示应用RT-PCR技术在乳腺癌转移患者的外周血,骨髓中特异地检测到MAM mRNAPier Francesco Ferrucci[9]的研究证明,MAM基因在白细胞分离术产物中的表达可以作为乳腺癌高危患者预后效果差的指示剂。因此MAM[11]可用于:乳腺癌淋巴结、外周血和骨髓转移的监测;组织来源未知肿瘤的鉴别;乳腺癌检测尤其是早期检测,不同部位的MAMMAM mRNA的检测可作为原发性、转移性和隐匿性乳腺癌的标志物[14]

2MAM与亲脂素B的异源双链体

MAM与亲脂素B形成的异源双链体可通过利用MAM的启动子区来激活乳腺癌细胞的促凋亡基因Bax[11]Bax仅在一定的MAM阳性水平的基础上才表达,以促进MAM阳性的细胞凋亡。它可诱导>80%的乳腺癌细胞和一些正常乳房上皮细胞凋亡。这可以看作是生物化学水平的乳房切除术,即可以只切除遗传方面的乳腺肿瘤细胞和良性乳房肿瘤上皮细胞,而保留脂肪组织和间质成分。早期的研究表明,此异源双链体可结合于乳腺肿瘤细胞,这提示我们可以将MAM标记放射同位素或毒素,结合标记的MAM复合物,诱发肿瘤细胞死亡。因此MAM可以作为免疫靶位,制备乳腺癌疫    [1216]

3MAM-A

Fleming TP的研究中[13]HLA-A2+/CD8+的双重转基因鼠的模型确定了七个MAM-A衍生肽,可与HLA-A2CD8+CTLs结合[18]MAM-A3MAM-A7可诱导T淋巴细胞特异性多肽。其中仅对MAM-A3有特异性的T淋巴细胞可以识别MDA415转染HLA-A2中的乳腺肿瘤细胞株MAM高表达,但不识别MDA415转染HLA-A24MAM阴性,HLA-A2阳性的乳腺癌细胞株[15]。因此MAM-A的衍生肽MAM-A3可以诱导MAM-A的特异性免疫应答,并可为乳腺癌疫苗治疗所应用。而Narayanan K[12]最近构造出一个DNA片段疫苗,此DNA片段序列可使人体内产生MAM-A。在动物实验模型中已证实此DNA疫苗可以诱导免疫系统对MAM-A产生免疫应答,结果显示分泌MAM-A的小鼠的乳腺肿瘤停止生长并缩小,不分泌MAM-A的小鼠乳腺肿瘤则继续生长。但针对MAM-ADNA片段疫苗需要在乳腺癌高危或乳腺癌复发的患者身上进行进一步的临床实验已确定是否对人有效[17]

 

展望

 

Mammglobin已为人们研究了近十年,其具体作用机制和生物特性并为研究透彻。以往的大量研究资料证明,MAM因其在乳腺癌中的特异性表达可作为乳腺癌诊断、疗效、预后效果和转移的标记物。近年的研究显示MAM可作为T细胞的免疫应答靶位,用于乳腺癌免疫治疗。乳腺癌疫苗的制备是最近几年的研究热门,MAM可成为疫苗的攻击靶点[19],诱导乳腺癌细胞死亡。

 

 

1.          Bundred NJ. Prognosticand predictive factors in breast cancer. Cancer Treat Rev2001273:137142

2.          刘洁润,抑制端粒酶活性治疗乳腺癌的新进展,南华大学学报(医学版),2003.316):193.

3.          Watson MAFleming TP .MAMa mammary specific member of the uteroglobin gene familyis overexpressed in human breast cancer.Cancer Res1996564:860 865.

4.          Fleming TPWatson MA.MAMa breast-specific geneand its utility as a maker for breast cancer. Ann NY Acad SCI2000923:78-89

5.          Kalff Ni JSuske MGentz Retal. All human genes of the uteroglobin family are localized on chromosome 11q12.2 and form a densecluster. Ann N Y Acad SCI2000923:25 42.

6.          Janku FKleibl ZNovotny JTesarova P. MAM A a novel marker of minimal residual disease in early stages breast cancer.Neoplasma2004513:204-8.

7.          Carter DDavin C. Serum Antibodies to Lipophilin B Detected in Late Stage Breast Cancer Patients.Clinical Cancer Research20039:749-754.

8.          Carter DDouglass JF Cornellison CDet al. Purification and characterization of the MAM/lipophilin-B complexa promising diagnostic marker or breast cancer.Biochemistry20024121: 6714 6722.

9.          Silva A.LCorreia A.Eand.Passos-Coelho J.L. Human MAM RT-PCR assay for detection of occult breast cancer cells in hematopoietic product. Annals of Oncllogy 200213:422-429.

10.       Colpitts TLBilling P Granados E. Mammaglobin complexes with BU101 in  breast tissue. Ann N Y Acad Sci2000923:312 315.

11.       Goedegebuure PSWatson MAFleming TP. MAM-based strategies for treatment of breast cancer. Curr Cancer Drug Targets. 200446:531-42.

12.       Narayanan KJaramillo ABenshoff ND. Response of established human breast tumors to vaccination with MAM-A cDNA. J Natl Cancer Inst. 20049618:1388-96.

13.       Tanaka YAmos KDFleming TPEberlein TJMAM-A is a tumor-associated antigen in human breast carcinoma. Surgery. 20031331:74-80.

14.       郭会芹,潘秦镜.乳腺癌相关生物标志.诊断病理学杂志,2004112):117

15.       Majumder KManna PPFleming TP. Identification of HLA-A3-restricted CD8+ T cell epitopes derived from MAM-Aa tumor-associated antigen of human breast cancer. Int J CancerDecember 1020021025: 499-506.

16.       Ostrand-Rosenberg SSinha PDanna EA. Antagonists of tumor-specific immunity: tumor-induced immune suppression and host genes that co-opt the anti-tumor immune response. Breast Dis. 200420:127-35.

17.       Idenoue SHirohashi YTorigoe T. A potent immunogenic general cancer vaccine that targets survivinan inhibitor of apoptosis proteins. Clin Cancer Res. 2005 15114:1474-82.

18.       Jaramillo ANarayanan KCampbell LG. Recognition of HLA-A2-restricted MAM-A-derived epitopes by CD8+ cytotoxic T lymphocytes from breast cancer patients. Breast Cancer Res2004 881:29-41.

Theresa V Strong. Gene therapy for carcinoma of the breast: Genetic immunotherapy. Breast Cancer Res20002:15-21.
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